Saggi cellulari per valutare l’attività di varianti di significato incerto del gene GLA associato alla malattia di Fabry

Questo progetto è stato finanziato grazie al Bando Spring Seed Grant 2022 da Fondazione Telethon.

Quella di Anderson-Fabry è una malattia da accumulo lisosomiale, causata da mutazioni del gene GLA. Questo gene codifica per l’alfa–galattosidasi, proteina deputata alla degradazione di un grasso noto come globotriaosilceramide (Gb3), che se non smaltito si accumula nei lisosomi (le centrali degradative delle nostre cellule) causando danni agli organi e ai tessuti. La severità della malattia di Fabry dipende da vari fattori, tra cui il tipo di mutazione. Sono state identificate più di 1000 diverse mutazioni patologiche del gene GLA e nella maggior parte dei casi è già possibile correlarle con la severità dei sintomi. Tuttavia, esistono alcune “varianti di significato incerto” (Variants of Unknown Significance - VUS), in cui questa correlazione è controversa, se non addirittura sconosciuta. Questa difficoltà può essere imputata anche al tipo di saggio usato per misurare l’attività di GLA, che non è efficace nel definire l’effettiva capacità della proteina di agire su Gb3 nel lisosoma. In questo studio proponiamo di sviluppare dei saggi cellulari alternativi, che misurino la capacità delle varianti di GLA di raggiungere la loro sede naturale, il lisosoma, e di agire su Gb3. Una volta miniaturizzati e automatizzati, questi saggi potrebbero contribuire a migliorare la capacità diagnostica nella malattia di Fabry.